Выбор правильного хозяина

В норме в клетках ненужные и чужеродные белки разрушаются. Вам необходимо выбрать клетку-хозяина, которая не будет разрушать инсулин до его секретирования. Чтобы найти клетку-хозяина, толерантную к чужеродному белку, нужно создать субпопуляции клеток, выращивая их в различных условиях. Вы можете отобрать клетки, в которых мало протеолитических ферментов, необходимых для разрушения белков. Может быть, будет необходимо вывести особые штаммы бактерий, а для некоторых белков — использовать эукариотическую клетку, например, если белок токсичен для бактерий. Если целью является исследование экспрессии генов, эукариотические клетки, без сомнения, станут в данном случае лучшим выбором. Наиболее популярным в исследованиях ДНК одноклеточным эукариотическим организмом являются пекарские дрожжи Saccharomyces cerevisiae. Эукариотические клетки труднее поддерживать в культуре, и они требуют вектор другого типа (это будет обсуждаться ниже).


Оставить комментарий

Ваш комментарий